3 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Сдать анализ на helicobacter pylori днк реал тайм пцр

Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori), качественное определение антигенов (иммунохроматографический экспресс-метод)

Нельзя собирать кал из памперсов, после клизмы, после введения ректальных свечей или приема медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника, с примесями мочи или выделений из половых органов. Небольшое количество кала забирают из разных мест одноразовой лопаточкой (4-5 раз). Следует избегать примеси мочи и выделений из половых органов.

Helicobacter pylori – бактерия в форме спирали, которая поражает стенку желудка и двенадцатиперстной кишки, вызывая атрофический гастрит, язвенную болезнь и злокачественные образования. Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки практически в 100% случаев ассоциирована с H.pylori.

Все многообразие методов обнаружения хеликобактерной инфекции основано на определении собственно H. pylori (прямые методы) либо продуктов активной жизнедеятельности бактерии (уреазный дыхательный тест), а также подразделяются на инвазивные (гастроскопия) и неинвазивные. На V Маастрихтской согласительной конференции во Флоренции (2015 г.) одним из основных неинвазивных методов, который рекомендуется для стратегии «test-and-treat» («выявляй и лечи»), признан тест по определению антигенов H.pylori в кале.

Образцы кала лучше исследовать в период обострения болезни, т.к. через неделю после проявления симптомов активной инфекции количество бактерий в фекалиях сокращается. Определение антигенов H. pylori в кале в международной практике служит не только методом диагностики инфекции H.pylori, а также широко используется для диагностики успешности эрадикационной терапии (не ранее чем через 4 недели после окончания курса антихеликобактерной терапии, либо после окончания лечения любыми антибиотиками или антисекреторными средствами сопутствующих заболеваний). Отсутствие антигенов возбудителя в кале через 4 недели после окончания лечения свидетельствует об успешности эрадикационной терапии.

Показания к назначению исследования:

  • первичная диагностика хеликобактерной инфекции;
  • оценка эффективности эрадикационной терапии.

Интерпретация результатов

Пример результата (вариант нормы):

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«serv_cost»]=> string(3) «860» [«cito_price»]=> string(4) «1720» [«parent»]=> string(2) «25» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(1) < [0]=>array(3) < ["cito"]=>string(1) «Y» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(6) «Кал» > > >

Нельзя собирать кал из памперсов, после клизмы, после введения ректальных свечей или приема медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника, с примесями мочи или выделений из половых органов. Небольшое количество кала забирают из разных мест одноразовой лопаточкой (4-5 раз). Следует избегать примеси мочи и выделений из половых органов.

Helicobacter pylori – бактерия в форме спирали, которая поражает стенку желудка и двенадцатиперстной кишки, вызывая атрофический гастрит, язвенную болезнь и злокачественные образования. Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки практически в 100% случаев ассоциирована с H.pylori.

Все многообразие методов обнаружения хеликобактерной инфекции основано на определении собственно H. pylori (прямые методы) либо продуктов активной жизнедеятельности бактерии (уреазный дыхательный тест), а также подразделяются на инвазивные (гастроскопия) и неинвазивные. На V Маастрихтской согласительной конференции во Флоренции (2015 г.) одним из основных неинвазивных методов, который рекомендуется для стратегии «test-and-treat» («выявляй и лечи»), признан тест по определению антигенов H.pylori в кале.

Образцы кала лучше исследовать в период обострения болезни, т.к. через неделю после проявления симптомов активной инфекции количество бактерий в фекалиях сокращается. Определение антигенов H. pylori в кале в международной практике служит не только методом диагностики инфекции H.pylori, а также широко используется для диагностики успешности эрадикационной терапии (не ранее чем через 4 недели после окончания курса антихеликобактерной терапии, либо после окончания лечения любыми антибиотиками или антисекреторными средствами сопутствующих заболеваний). Отсутствие антигенов возбудителя в кале через 4 недели после окончания лечения свидетельствует об успешности эрадикационной терапии.

Показания к назначению исследования:

  • первичная диагностика хеликобактерной инфекции;
  • оценка эффективности эрадикационной терапии.

Анализы на хеликобактер пилори: как сдавать биоматериал и можно ли расшифровать результаты самостоятельно

Проблемы с желудком доставляют огромный дискомфорт и подчас мешают вести привычный образ жизни. Боли в области живота, тошнота, отрыжка, тяжесть в желудке способны разрушить любые планы и надолго выбить из колеи. Ситуация серьезно осложняется, если такие явления обретают хронический характер. В чем может крыться причина желудочных расстройств и как ее устранить? Давайте в этом разберемся.

Что такое хеликобактер пилори и зачем нужен анализ

Очень часто проблемы с желудком вызывает коварная бактерия — хеликобактер пилори ( Helicobacter pylori ). Она имеет спиралевидную форму, является патогенной бактерией-паразитом, производит множество токсинов, поражающих слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки — именно в этих органах она обитает. Хеликобактер пилори приводит к воспалительным процессам, таким как гастрит, язва и ряду других, появление которых еще не так давно объясняли генетической предрасположенностью и нарушением здорового питания. Доказано, что в ряде случаев гастрит и язва вызваны именно инфицированием этой бактерией. То есть этими заболеваниями, оказывается, можно так же легко заразиться, как и гриппом.

Читать еще:  Диагностика панкреатита на основании фгдс

Причем если большинство бактерий гибнет в кислой желудочной среде, то хеликобактер пилори в ней очень даже жизнеспособна. Она легко приспосабливается к агрессивной среде и без особого труда передвигается по стенкам внутренних органов благодаря специальным жгутикам на ее поверхности.

В России распространенность бактерии очень велика — в разных регионах инфицировано от 70 до 90% населения, что значительно выше показателей Европы и США. Это объясняется сравнительно низким уровнем жизни большинства россиян, как следствие — пренебрежение правилами гигиены, проживание в антисанитарных условиях. В Москве, как наиболее развитом городе России, количество инфицированных не превышает 60% (речь идет о зарегистрированных гражданах).

Как правило, поводом для назначения анализа на хеликобактер пилори становятся следующие симптомы:

  • Боли в желудке после приема пищи.
  • Частая отрыжка.
  • Повторяющаяся изжога.
  • Затруднение во время глотания пищи.
  • Метеоризм и урчание в животе.
  • Тошнота и рвота.
  • Частая диарея и запоры, длящиеся более двух суток.
  • Нарушение аппетита и потеря веса без видимой причины.
  • Появление крови во время рвоты и дефекации.

Разумеется, перечисленные симптомы вовсе не указывают на инфекцию. Подтвердить или опровергнуть ее присутствие может только лабораторный анализ.

Виды анализа на хеликобактер пилори

Выявить присутствие коварной бактерии в организме можно разными способами.

Анализ кала

Этот анализ является качественным, то есть отвечает на вопрос, есть ли хеликобактер пилори в организме или нет. Исследование проводится в лаборатории методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Анализ отличается высокой точностью — до 95%. Данный анализ является самым простым видом диагностики. Его рекомендуют детям, пожилым людям и тяжелобольным пациентам.

Анализ крови

Как сдавать биоматериал на анализ хеликобактер пилори

Точность результатов исследования зависит не только от лаборатории, но и от соблюдения ряда простых правил подготовки к анализу.

Подготовка к анализу кала

Как минимум за месяц до исследования пациент не должен принимать никаких антибиотиков. Кроме того, за трое суток до забора биоматериала необходимо отказаться от «красящих» продуктов (свекла, виноград, черная смородина, красное вино и другие) и продуктов, содержащих грубую клетчатку (капуста, морковь, редис, редька, свекла, отруби). Также нельзя принимать препараты, стимулирующие перистальтику желудка.

Кал собирают в специальный контейнер, купленный в аптеке. Если контейнер будет заполнен на 1/3, этого будет достаточно для анализа. Ни в коем случае нельзя брать кал из унитаза — в биоматериал могут попасть дезинфицирующие средства. Доставить материал в лабораторию для анализа нужно как можно быстрее. Максимальное время его хранения — 10–12 часов при температуре +2…-8 градусов Цельсия.

Подготовка к анализу крови

Накануне анализа следует избегать физических и эмоциональных нагрузок, отказаться от алкоголя и жирной пищи. Кровь берут из вены натощак в утренние часы. Сама по себе процедура достаточно безболезненна и длится всего несколько минут. Однако пациенты по-разному ее переносят. Поэтому если организм ослаблен, то сразу после забора крови рекомендуется выпить сладкий чай или съесть кусочек черного шоколада — это поможет избежать головокружения. Чтобы не образовалась гематома на месте ввода иглы, после процедуры руку нужно несколько минут подержать согнутой в локте.

Расшифровка результатов

Результаты анализов на хеликобактер пилори может интерпретировать только врач, он же ставит окончательный диагноз и назначает подходящую терапию. Однако некоторые выводы можно сделать и самостоятельно изучив бланк с результатами.

Анализ кала

Этот анализ готовится один день. Так как исследование является качественным, то на бланке может содержаться один из двух вариантов ответа: «отрицательный» или «положительный».

Анализ крови

  • Иммуноферментный анализ. Результаты анализа на антитела готовятся в течение одного дня, не считая дня сдачи анализа. При необходимости возможна срочная подготовка результатов, она займет всего 2–3 часа. В разных лабораториях могут использоваться разные единицы измерения. Одна из наиболее распространенных — Ед/мл.

Результаты трактуются следующим образом:

«Положительно»

«Сомнительно»

«Отрицательно»

>1,1 Ед/мл
Высокий риск развития язвенной болезни или язвенная болезнь; высокий риск развития рака желудка.

0,9–1,1 Ед/мл
Рекомендуется повторный анализ через две недели.

Бак­те­рия хе­ли­ко­бак­тер пи­ло­ри — свое­об­раз­ная тем­ная ло­шад­ка, на се­год­няш­ний день ма­ло изу­чен­ная и тем — бо­лее опас­ная. До сих пор оста­ет­ся мно­жест­во от­кры­тых во­про­сов: по­че­му не­ко­то­рые ин­фи­ци­ро­ван­ные лю­ди за­бо­ле­ва­ют яз­вой или гаст­ри­том, а дру­гие — нет; на­сколь­ко при­сут­ст­вие этой бак­те­рии в ор­га­низ­ме уве­ли­чи­ва­ет риск раз­ви­тия ра­ка же­луд­ка? Оче­вид­на не­об­хо­ди­мость раз­ра­бот­ки вак­ци­ны для про­фи­лак­ти­ки ин­фек­ции, по­иск ан­ти­био­ти­ков на­прав­лен­но­го дейст­вия, уби­ва­ю­щих бак­те­рию, — ведь у не­ко­то­рых лю­дей раз­ви­ва­ет­ся ре­зис­тент­ность к су­щест­ву­ю­щим ви­дам те­ра­пии. Единст­вен­ное, что мы мо­жем на­вер­ня­ка сде­лать во бла­го сво­е­му здо­ровью, — сдать про­фи­лак­ти­чес­кий ана­лиз.

Читать еще:  Сдать анализ на аллерген f90 солод ige

Helicobacter pylori, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Выявление Helicobacter pylori (H. pylori), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микроорганизма в образце биоматериала.

Синонимы русские

Хеликобактер [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени].

Синонимы английские

H. pylori, Helicobacter pyloridis, DNA [real-time polymerase chain reaction, RT-PCR, quantitative RT-PCR, qPCR, qRT-PCR].

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Общая информация об исследовании

H. pylori – это грамотрицательная подвижная бактерия, устойчивая к воздействию соляной кислоты и способная колонизировать слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. Как правило, первичное инфицирование происходит в детстве и протекает бессимптомно, но у некоторых людей с течением времени приводит к развитию серьезных заболеваний. H. pylori обнаруживается в подавляющем большинстве случаев гастрита и язвенной болезни и, кроме того, многократно увеличивает риск развития аденокарциномы и В-клеточной лимфомы желудка. Современная диагностика этих заболеваний невозможна без точной и быстрой идентификации H. pylori.

H. pylori может быть выявлена с помощью нескольких методов. В настоящее время доступны неинвазивные методы диагностики, обладающие преимуществом простоты и безопасности взятия образца для исследования (исследование кала), что имеет особое значение при обследовании пожилых людей, детей, а также в условиях амбулатории.

Helicobacter очень чувствительна к воздействию желчных кислот и пониженного содержания кислорода, поэтому при пассаже химуса через двенадцатиперстную и толстую кишку количество бактерий значительно снижается. Кроме того, активные спиралевидные формы бактерии претерпевают морфологические изменения, обеспечивающие большую устойчивость в неблагоприятных условиях. Результатом этого становится низкая концентрация микроорганизмов и преобладание кокковых форм в кале, что следует учитывать при выборе лабораторного метода исследования этого биоматериала. Среди многих неинвазивных методов особое место занимает исследование с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Полимеразная цепная реакция в реальном времени (РТ-ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в кале) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. РТ-ПЦР характеризуется очень высокой чувствительностью (93-95 %), что является преимуществом при анализе кала. В отличие от бактериологического посева, это исследование позволяет выявлять как спиралевидные, так и кокковые (некультивируемые) формы H. pylori. Из-за того что в реакции выявляется ДНК микроорганизма, исследование не применяется для дифференциальной диагностики текущей инфекции или инфекции в анамнезе – результат анализа будет положительным еще некоторое время после полной эрадикации H. pylori, что обусловлено выявлением фрагментов разрушенных ДНК микроорганизма.

На слизистой оболочке желудка могут также присутствовать другие представители рода Helicobacter (H. suis, H. baculiformis). Несмотря на то что их значение в развитии заболеваний ЖКТ еще до конца не установлено, они играют определенную роль при идентификации H. pylori. Так, например, лабораторные исследования, основанные на выявлении общего для всех видов Helicobacter антигена, будут характеризоваться большим числом ложноположительных результатов исследования на H. pylori за счет выявления других видов (как в случае с ELISA). Это практически исключено в исследовании с помощью РТ-ПЦР, так как реакция основана на выявлении специфического для H. pylori фрагмента ДНК.

Диагностика хеликобактериоза у детей представляет определенные трудности. Это связано с невыполнением ребенком дыхательного маневра при использовании уреазного дыхательного теста, а также необходимостью наркоза при использовании инвазивных методов. Исследование кала с помощью РТ-ПЦР является хорошей альтернативой этим методам и поэтому может быть с успехом применено в педиатрической практике.

Высокое содержание неорганических солей (фосфатов, кальция), ферментов ЖКТ, полисахаридов, желчных кислот и солей, растительных волокон, слизи и других компонентов кала может ингибировать РТ-ПЦР, поэтому подготовка к тесту требует должного внимания со стороны пациента и врача. Интерпретация результата анализа проводится с учетом дополнительных лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Для диагностики заболеваний, вызванных H. pylori:

  • атрофического или антрального гастрита;
  • язвы желудка и двенадцатиперстной кишки.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на гастрит или язвенную болезнь у детей и пожилых людей.
  • При невозможности использования инвазивных методов идентификации H. pylori у пациентов любого возраста.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

  • текущая H. pylori-инфекция;
  • H. pylori-инфекция в анамнезе.
  • отсутствие H. pylori-инфекции.

Что может влиять на результат?

  • Присутствие в образце кала крови, желчи, избытка неорганических солей и других компонентов может приводить к получению ложноотрицательного результата.
  • Лечение препаратами тетрациклина, пенициллина (аминопенициллины), макролидами (кларитромицин, азитромицин) и метронидазолом может приводить к получению ложноотрицательного результата.
Читать еще:  Сдать анализ на ureaplasma species днк количественно реал тайм пцр



Важные замечания

  • Исследование не позволяет дифференцировать текущую H. pylori-инфекцию и инфекцию в анамнезе.

Также рекомендуется

  • Helicobacter pylori, IgA (количественно)
  • Helicobacter pylori, IgG (количественно)
  • Helicobacter pylori, антиген
  • Гастрин
  • Пепсиноген I
  • Пепсиноген II
  • Антитела к париетальным (обкладочным) клеткам желудка
  • Лабораторное обследование — гастрит и язвенная болезнь желудка
  • Лабораторная диагностика и мониторинг атрофического гастрита и язвенной болезни
  • Анализ кала на скрытую кровь
  • Копрограмма

Кто назначает исследование?

Гастроэнтеролог, педиатр, врач общей практики.

Литература

  • Tahereh Falsafi, Raha Favaedi, Fatemeh Mahjoub, and Mehri Najafi. Application of Stool-PCR test for diagnosis of Helicobacter pylori infection in children.
  • Kabir S. Detection of Helicobacter pylori DNA in feces and saliva by polymerase chain reaction: a review. Helicobacter. 2004 Apr;9(2):115-23. Review.
  • Sen N, Yilmaz O, Simsek I, Küpelioglu AA, Ellidokuz H. Detection of Helicobacter pylori DNA by a simple stool PCR method in adult dyspeptic patients. Helicobacter. 2005 Aug;10(4):353-9.
  • Monteiro L, Gras N, Vidal R, Cabrita J, Mégraud F. Detection of Helicobacter pylori DNA in human feces by PCR: DNA stability and removal ofinhibitors. J Microbiol Methods. 2001 Jun;45(2):89-94.

Хеликобактер пилори, ДНК H.pylori

Описание

Хеликобактер пилори, ДНК H.pylori, качественный — определение ДНК Helicobacter pylori в кале, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Метод ПЦР — позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК микроорганизма, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий, специфичных для данного возбудителя участка ДНК.

С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.

Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori) — это спиралевидная бактерия, которая инфицирует желудок и двенадцатиперстную кишку. Этот возбудитель может приводить к различным поражениям желудочно-кишечного тракта, развитию язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, хронического гастрита.

Хеликобактер чувствителен к действию высоких температур, но длительно сохраняется во влажной среде. Сама по себе бактерия не приводит к образованию язв. Она приводит к стимуляции образования соляной кислоты и нарушает защиту от воздействия кислоты на слизистую желудка, приводя к развитию воспалительного процесса.

ПЦР характеризуется очень высокой чувствительностью (93–95 %), что является преимуществом при анализе кала. В отличие от бактериологического посева, это исследование позволяет выявлять как спиралевидные, так и кокковые (некультивируемые) формы H. pylori. Из-за того что в реакции выявляется ДНК микроорганизма, исследование не применяется для дифференциальной диагностики текущей инфекции или инфекции в анамнезе — результат анализа будет положительным еще некоторое время после полной эрадикации H. pylori, что обусловлено выявлением фрагментов разрушенных ДНК микроорганизма.

Следует учитывать, что образование язвы желудка и развитие гастрита связано с колонизацией слизистой желудка токсигенными штаммами бактерий. Заражение нетоксигенными штаммами, приводит к развитию этих заболеваний в небольшом количестве случаев.

Диагностика хеликобактериоза у детей
Диагностика хеликобактериоза у детей представляет определенные трудности. Это связано с невыполнением ребенком дыхательного маневра при использовании уреазного дыхательного теста, а также необходимостью наркоза при использовании инвазивных методов. Исследование кала с помощью РТ-ПЦР является хорошей альтернативой этим методам и поэтому может быть с успехом применено в педиатрической практике.

Показания:

  • для диагностики заболеваний, вызванных H. pylori: атрофического или антрального гастрита;
  • язвы желудка и двенадцатиперстной кишки.

Подготовка
Для получения достоверного результата, анализ должен проводиться спустя 14–21 день после последнего приема антибактериальных препаратов.

Предпочтительно взятие пробы в первые 72 часа от начала заболевания.

Кал собирается в одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой в объеме не более 1/3 от объема контейнера. Кал должен быть свежесобранным. Материал доставляется в медицинский офис в течение 4–6 часов с момента сбора анализа.

В направительном бланке обязательно должен быть указан диагноз и дата начала заболевания, сведения о приёме антибиотиков. При взятии материала необходимо соблюдать стерильность.

Условия, соблюдение которых обязательно:

  • не допускается замораживание;
  • не допускается длительное хранение (более 5–6 часов);
  • не пригодны никакие транспортные среды, кроме указанной;
  • не допускается неплотно закрытый контейнер;
  • не подлежит исследованию биоматериал, собранный накануне.

Интерпретация результатов
Ответ выдается в качественном формате: «обнаружено» или «не обнаружено».

Референсные значения: не обнаружено.

«Обнаружено»:

  • текущая H. pylori-инфекция;
  • H. pylori-инфекция в анамнезе.

«Не обнаружено»:

  • отсутствие H. pylori-инфекции;
  • неправильное взятие биоматериала для исследования.

Что может влиять на результат?

  • Присутствие в образце кала крови, желчи, избытка неорганических солей и других компонентов может приводить к получению ложноотрицательного результата.
  • Лечение препаратами тетрациклина, пенициллина (аминопенициллины), макролидами (кларитромицин, азитромицин) и метронидазолом может приводить к получению ложноотрицательного результата.
Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector