1 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Сдать анализ на 8 oh дезоксигуанозин в крови

8-OH-дезоксигуанозин в крови

8-OH-дезоксигуанозин (8-OHdG) – модифицированный нуклеозид, являющийся клинико-лабораторным маркёром оксидативного стресса и канцерогенеза. Используется для диагностики, прогноза и контроля лечения онкологических и инфекционно-воспалительных заболеваний.

Синонимы русские

Синонимы английские

8-Hydroxydeoxyguanosine, Blood, 8-OHdG, 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine.

Метод исследования

Высокоэффективная жидкостная хроматография.

Единицы измерения

Нг/мл (нанограмм на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не принимать пищу в течение 2-3 часов до анализа, можно пить чистую негазированную воду.
  • Не курить в течение 30 минут до анализа.

Общая информация об исследовании

8-OH-дезоксигуанозин (8-OHdG) – модифицированный нуклеозид, образующийся в молекуле ДНК в результате воздействия активных форм кислорода и других повреждающих факторов. Он обладает выраженными мутагенными свойствами и в настоящее время рассматривается в качестве клинико-лабораторного маркёра оксидативного стресса и канцерогенеза (развития опухоли).

Активные формы кислорода, азота и хлора являются неотъемлемой частью нормального метаболизма клеток и выполняют ряд важных функций, в том числе защищают от микроорганизмов. Один из их побочных эффектов – их взаимодействие с молекулами белков, липидов и нуклеиновых кислот.

ДНК – это наиболее чувствительный к оксидативному стрессу компонент клеток. Под воздействием активных форм кислорода молекула ДНК подвергается биохимическим изменениям, некоторые из которых обладают мутагенными и канцерогенными эффектами. Одно из таких изменений – окисление азотистого основания гуанина и образование 8-OHdG. В отличие от нормального нуклеозида (дезоксигуанозина), образующего парные комплексы гуанин-цитозин, модифицированный гуанозин 8-OHdG утрачивает способность к комплементарному взаимодействию азотистых оснований, и получаются комплексы гуанин-тимин или гуанин-аденин. Нарушение структуры молекулы ДНК – это один из механизмов канцерогенеза. Повышение уровня 8-OHdG выявлено при злокачественных образованиях желудочно-кишечного тракта, лёгких, молочных желёз, раке простаты и мочевого пузыря. Кроме того, высокая концентрация 8-OHdG отмечена при острых и хронических воспалительных заболеваниях, таких как сахарный диабет и атеросклероз. Курение, чрезмерное солнечное облучение и высокое потребление животных жиров связаны с повышенным уровнем 8-OH-дезоксигуанозина.

В отличие от других модифицированных окисленных форм гуанина, 8-OHdG легко проникает из клеток в кровоток. Благодаря этому он считается одним из лучших клинико-лабораторных маркёров оксидативного стресса. Следует, однако, отметить, что исследование имеет некоторые ограничения, которые необходимо учитывать при оценке результата теста. Так, 8-OHdG наиболее точно отражает степень повреждения ДНК, вызванного воздействием активных форм кислорода (перекиси, суперокисида), и в меньшей степени – вызванного воздействием реактивного азота и хлора. Кроме того, 8-OHdG не единственный модифицированный нуклеозид, образующийся в результате химического повреждения ДНК. Следует также отметить, что химическое повреждение ДНК происходит и в норме (на каждые 105 азотистых оснований приходится 1 модифицированное азотистое основание).

При интерпретации результатов исследования уровня 8-OHdG и при оценке оксидативного стресса у конкретного больного целесообразно проводить дополнительные исследования, в первую очередь на маркёры антиоксидантной системы крови (глутатион, ретинол, альфа-токоферол, аскорбиновая кислота и некоторые другие микроэлементы). Концентрация 8-OHdG зависит от уровня соединений, обладающих антиоксидантной активностью. Кроме того, рекомендуется оценивать и другие маркёры оксидативного стресса (малоновый диальдегид).

Для чего используется исследование?

  • Для оценки оксидативного стресса;
  • для диагностики, прогноза и контроля лечения широкого спектра онкологических и инфекционно-воспалительных заболеваний.

Когда назначается исследование?

  • При наблюдении за пациентами с онкологическими заболеваниями желудочно-кишечного тракта, лёгких, молочных желёз, раком простаты и мочевого пузыря, а также инфекционно-воспалительными заболеваниями.

Что означают результаты?

Референсные значения: 0,1 — 0,3 нг/мл.

Причины повышения уровня 8-OH-дезоксигуанозина:

  • онкологические заболевания желудочно-кишечного тракта;
  • аденокарцинома молочной железы;
  • аденокарцинома легкого;
  • рак мочевого пузыря;
  • аденокарцинома предстательной железы;
  • сахарный диабет;
  • атеросклероз.

Причины понижения уровня 8-OH-дезоксигуанозина:

  • лечение вышеуказанных заболеваний;
  • активация антиоксидантной системы организма.

Что может влиять на результат?

  • Курение, избыточное солнечное облучение и высокое потребление животных жиров связаны с повышенным уровнем 8-OHdG;
  • концентрация 8-OHdG зависит от уровня соединений, обладающих антиоксидантной активностью (глутатион, ретинол, альфа-токоферол, аскорбиновая кислота и некоторые другие микроэлементы).

Важные замечания

  • 8-OHdG в норме определяется в небольших количествах.
  • 8-OHdG наиболее точно отражает степень повреждения ДНК, вызванного воздействием активных форм кислорода (перекиси, супероксида).
  • Результат исследования следует оценивать с учётом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Онколог, врач общей практики.

Литература

  • Halliwell B. Why and how should we measure oxidative DNA damage in nutritional studies? How far have we come? Am J Clin Nutr. 2000 Nov;72(5):1082-7.
  • Ock CY, Kim EH, Choi DJ, Lee HJ, Hahm KB, Chung MH. 8-Hydroxydeoxyguanosine: not mere biomarker for oxidative stress, but remedy for oxidative stress-implicatedgastrointestinal diseases. World J Gastroenterol. 2012 Jan 28;18(4):302-8.
  • Valavanidis A, Vlachogianni T, Fiotakis C. 8-hydroxy-2′ -deoxyguanosine (8-OHdG): A critical biomarker of oxidative stress and carcinogenesis. J Environ Sci Health C Environ Carcinog Ecotoxicol Rev. 2009 Apr;27(2):120-39.
Подписка на новости

Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed

8-ОН-2-деоксигуанозин, 96

DNA Damage (определение 8-0Н-2-дезоксигуанозина) в сыворотке, слюне, 96

Набор Assay Designs DNA Damage ELISA основан на быстром и чувствительном конкурентном иммуноферментном методе и предназначен для количественного определения 8-гидрокси-2’-деоксигуанозина (8-OHdG) в образцах мочи, сыворотки и слюны.

Читать еще:  Сдать анализ на аллерген g14 овес культивированный ige

8-OHdG становится часто используемым маркером окислительного повреждения ДНК и оксидативного стресса. Измерение уровня 8-OHdG в моче может быть использовано в качестве индикатора окислительного повреждения.

В методе Assay Designs DNA Damage ELISA используются моноклональные антитела к 8-OHdG, для связывания, на конкурентной основе, с 8-OHdG из образца , стандарта, или предварительно нанесенного в лунки 96 луночного планшета. Анти-8-OHdG связавшиеся с 8-OHdG образца или стандарта удаляются при промывке, тогда как антитела, захваченные иммобилизованным 8-OHdG выявляются вторыми антителами, конъюгированными с HRP.

В методе используется субстрат тетраметилбензидин и абсорбция измеряется на микропланштном фотометре при длине волны 450 нм.

Интенсивность желтого окрашивания обратно пропорциональна концентрации 8-OHdG.

Внутриклеточные и внеклеточные свободные радикалы могут быть потенциальными повреждающими агентами для живых клеток. Внутриклеточные свободные радикалы продуцируются в результате нормального метаболизма, а внеклеточные формы образуются в результате ультрафиолетового или ионизирующего излучения. Активные формы кислорода (ROS) представляют особый интерес в изучении окислительного повреждения и патологии. Различные ROS включают высокоактивный гидроксильный радикал (●OH), супероксидный радикал (O2●-), гипохлорит-ион (OCl●-) и нерадикальная перекись водорода (H2O2)1. ДНК, липиды и белки являются клеточными мишенями окислительного повреждения ROS, и очередность модификации зависит от локализации продукции ROS, доступности ионов металлов, и относительной способности мишени к окислению. Клетки обладают многочисленными механизмами защиты от окислительного повреждения ROS или другими свободными радикалами. Простейший механизм защиты представляет собой перехват свободных радикалов с участием витаминов C и E, которые сами становятся радикалами и защищают биомолекулы клеток от повреждения. Комплекс защитных механизмов включает такие ферменты, как супероксид дисмутаза, каталаза и глутатион пероксидаза, при участии которых происходит снижение уровня ROS. На низком уровне повреждения происходят и в нормальных клетках, так как ROS обладают свойством избегать механизмов защиты. Когда защитные механизмы не могут предупредить накопления ROS, происходит усиление клеточного повреждения.

Модифицированные липиды и белки удаляются с помощью нормальных механизмов обмена липидов и белков. Однако модифицированная ДНК не может быть заменена и должна быть восстановлена. В клетке существуют различные механизмы репарации ДНК, изучавшиеся при различных заболеваниях. Удаление поврежденной ДНК и восстановление целостности двойной спирали ДНК, активация чекпойнтов, контролирующих повреждения ДНК, которая останавливает клеточный цикл и предупреждает передачу поврежденных хромосом, изменения в транскрипционном ответе клетки и апоптоз – вот некоторые из важных ответных реакций клетки на повреждение ДНК. 8-гидрокси-2’деоксигуанозин (8-OHdG) – это модифицированное нуклеозидное основание, наиболее широко изученный и определенный побочный продукт повреждения ДНК, экскретируемый с мочой при репарации ДНК 3. Уровни 8-OHdG и его аналогов 8-гидроксигуанозина и 8- гидроксигуанина в моче связаны со многими дегенеративными заболеваниями. Ассоциация Взаимосвязь с ROS и использование 8-OHdG в качестве биомаркера оксидативного стресса были исследованы при многих заболеваниях, включая рак простаты и мочевого пузыря, муковисцидоз, атопический дерматит и ревматоидный артрит. Предполагается, что такие нейродегенеративные заболевания, как болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, хорея Гентингтона могут быть вызваны воздействием нейротоксинов у людей с генетической предрасположенностью к этим заболеваниям . Оксидативный стресс ассоциирован с патогенезом этих заболеваний и повышенные уровни повреждения ДНК были обнаружены при широком спектре неврологических состояний.

8-он-2′-дезоксигуанозин как маркер окислительной модификации ДНК у больных хроническими распространенными дерматозами Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Щелчкова Наталья Александровна, Копытова Т. В., Химкина Л. Н., Пантелеева Г. А.

Исследован уровень 8-ОН-2’-дезоксигуанозина в сыворотке крови больных с тяжелыми хроническими дерматозами. Показано, что по сравнению со здоровыми лицами в обследованной группе больных данный показатель повышен преимущественно у пациентов с атопическим дерматитом (на 62%) и менее у больных псориазом (на 25%) и пузырными дерматозами (на 18%). Определены статистически значимые отличия этого показателя от контрольных значений при эндогенной интоксикации и разной степени тяжести заболевания. Определение уровня 8-ОН-2’-дезоксигуанозина в сыворотке крови является информативным методом исследования, повышающим качество лабораторного мониторинга окислительного стресса .

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Щелчкова Наталья Александровна, Копытова Т. В., Химкина Л. Н., Пантелеева Г. А.

THE 8-OH-2-DESOXIGUANOSIN MARKER OF OXIDIZING MODIFICATION OF DNA IN PATIENTS WITH DIFFUSED DERMATITIS

The level of 8-OH-2-desoxiguanosin in blood serum of patients with severe chronic dermatitis was analyzed. It is demonstrated that in comparison with healthy patients in examined group of patients this indicator is increased mainly in patients with atopic dermatitis (up to 62%) and least of all with psoriasis (up to 25%) and bullous dermatitis (up to 18%). The statistically reliable differences of this indicator from control values under endogenic intoxication and different degree of severity of disease are determined. The detection of level of 8-OH-2-desoxiguanosin in blood serum is an informative technique of analysis to increase quality of laboratory monitoring of oxidizing stress .

Читать еще:  Сдать анализ на cytomegalovirus igg

Текст научной работы на тему «8-он-2′-дезоксигуанозин как маркер окислительной модификации ДНК у больных хроническими распространенными дерматозами»

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013 УДК 616.5-036.12-07:616.153.915-39

Н. А. Щелчкова, Т. В. Копытова, Л. Н. химкина, Г. А. Пантелеева

8-ОН-2′-ДЕЗОКСИГУАНОЗИН КАК МАPКЕP ОКИСЛИТЕЛьНОЙ МОДИФИКАЦИИ ДНК У БОЛьНЫХ ХPОНИЧЕСКИМИ PАСПPОСТPАНЕННЫМИ ДЕPМАТОЗАМИ

ГБОУ Нижегоpодский научно-исследовательский кожно-венеpологический институт

Исследован уровень 8-ОН-2′-дезоксигуанозина в сыворотке крови больных с тяжелыми хроническими дерматозами. Показано, что по сравнению со здоровыми лицами в обследованной группе больных данный показатель повышен преимущественно у пациентов с атопическим дерматитом (на 62%) и менее — у больных псориазом (на 25%) и пузырными дерматозами (на 18%). Определены статистически значимые отличия этого показателя от контрольных значений при эндогенной интоксикации и разной степени тяжести заболевания. Определение уровня 8-ОН-2′-дезоксигуанозина в сыворотке крови является информативным методом исследования, повышающим качество лабораторного мониторинга окислительного стресса.

Ключевые слова: 8-ОН-2′-дезоксигуанозин, дерматозы, эндогенная интоксикация, окислительный стресс

N.A. Scheltchrova, T.V. КоруОуа, L.N. Khimkina, G.A. Panteleyeva

THE 8-OH-2-DESOXIGUANOSIN MARKER OF OXIDIZING MODIFICATION OF DNA IN PATIENTS WITH

The level of 8-OH-2-desoxiguanosin in blood .serum of çatients with severe chronic dermatitis was analyzed. It is demonstrated that in comparison with healthy patients in examined groир of patients this indicator is increased mainly in patients with atopic dermatitis (ир to 622%) and least of all with psoriasis (ир to 25%) and bullous dermatitis (ир to 18%). The statistically reliable differences of this indicator from control values under endogenic intoxication and different degree of severity of disease are determined. The detection of level of 8-OH-2-desoxiguanosin in blood serum is an informative technique of analysis to increase quality of laboratory monitoring of oxidizing stress.

Key words: 8-OH-2-desoxiguanosin, dermatitis, endogenic intoxication, oxidizing stress

Исследованиями последних лет накоплен значительный экспериментальный и клинический материал, свидетельствующий о деструктивном влиянии процессов свободнорадикального окисления биомолекул на возникновение и развитие патологических процессов и заболеваний [9]. Неконтролируемые, нарастающие и длительное время циркулирующие окисленные макромолекулы формируют в организме патологические процессы, которые сопровождаются повышенным катаболизмом или гиперкатаболизмом. Они вызывают нарушение функции механизмов естественной детоксикации, развитие депрессии иммунной системы (метаболический иммунодефект) и гормональной регуляции. Это в свою очередь способствует накоплению в тканях и биологических жидкостях организма эндотоксинов, что ведет к нарастанию эндогенной интоксикации (ЭИ) и развитию синдрома полиорганной недостаточности [7, 10].

Известно, что большинство патологических процессов сопровождается дисбалансом между процессами окислительной деструкции биомолекул и активностью защитных антиоксидантных систем организма, что приводит его к состоянию окислительного стресса (ОС). Отрицательное патофизиологическое значение ОС глубоко и многообразно, о чем свидетельствует повреждение не только белковых и ли-пидных молекул, но и нуклеиновых кислот, выражающееся во множественных разрывах цепей, фрагментации рибозы (или дезоксирибозы) и модификации нуклеиновых оснований. Наиболее окисляющимся нуклеиновым основанием

Щелчкова Наталья Александровна, мл. науч. сотр. лаб. биохимии Адрес: 603138, Н. Новгород, ул. Строкина, 16А/41 Телефон: 8 (831) 419-37-14 E-mail: natalia-shelchkova@rambler.ru

является гуанозин, и накопление продуктов его окисления отражает глубину повреждений генетического аппарата клеток при ОС [5].

Значение процессов перекисного окисления липи-дов (ПОЛ) в развитии и прогрессировании хронических распространенных дерматозов (ХРД) известно из многих исследований [3, 11-13], немногочисленные сведения имеются о перекисном окислении белковых молекул [1, 10], и единичные работы посвящены изучению окислительной деструкции ДНК [8]. Выявлены тесные взаимосвязи между активностью ПОЛ, окислительной модификацией белков (ОМБ) и наличием в крови больных ХРД основного маркера ЭИ — молекул средней массы (МСМ) [4].

Целью настоящего исследования явилось изучение клинико-диагностической значимости определения продуктов окислительной модификации ДНК в сыворотке крови у больных хроническими распространенными дерматозами.

Материалы и методы. Обследованы больные разными хроническими распространенными дерматозами: атопическим дерматитом (АД) — 16 человек; псориазом (ПС) — 14 человек; пузырными дерматозами (ПД) -12 человек в возрасте от 30 до 60 лет. В контрольную группу вошли 20 человек без заболеваний кожи, не страдающих болезнями сердечнососудистой системы и желудочно-кишечного тракта. Все исследования проводили в замороженной сыворотке крови, взятой до начала курса лечения. Свежевзятые образцы крови центрифугировали при 1000 g в течение 10 мин, после чего замораживали. Определение окислительной модификации ДНК проводилось иммуноферментным методом количественного определения 8-ОН-2′-дезоксигуанозина с использованием набора Assay Desings DNA Damage ELISA (Кат.№ EKS-350). Оценку уровня ЭИ по количеству молекул средней массы в кислото-депротеинизированной сыворотке проводили по ранее описанной методике [5, 15, 16].

Статистическая обработка результатов осуществлена на основе методов вариационной статистики с использованием пакета прикладных программ Microsoft Exel 2007. Для оцен-

Рис. 1. Содержание 8-ОН-2′-дезоксигуанозина (в нг на 1 мл сыворотки) в сыворотке крови в норме и при хронических распространенных дерматозах (X ± m).

* — здесь и на рис. 2: достоверность различий с показателями в контрольной группе (р

Углекислый газ разрушает организм?

Обычно вред углекислого газа сводится к нарушению газообмена в организме. Мы уже писали про гипоксию и даже не один раз. Сейчас предлагаем посмотреть на СО2 под другим углом. И помогут нам в этом тайваньские ученые, которые провели первое в своем роде исследование. Они показали связь между СО2 и окислительным стрессом. Давайте разбираться, что это за стресс, почему из-за него разрушают клетки организма и при чем тут углекислый газ.

Читать еще:  Можно ли по глазам определить сахарный диабет

Ученые привлекли к эксперименту 344 офисных работников из 86 офисов. В их анализах исследователи искали вещество под названием 8-OH-дезоксигуанозин . Оно образуется под действием активных форм кислорода и является важным индикатором окислительного стресса .

Прежде чем переходить к результатам исследования, проведем небольшой ликбез по малознакомым (или вовсе незнакомым) словам из предыдущего абзаца:

  • Активные формы кислорода
  • Окислительный стресс
  • 8-OH-дезоксигуанозин (8-OHdG).

Если Вы знаете все эти слова, можете пролистать следующие три подзаголовка.

Активные формы кислорода (АФК)

Эта группа соединений: ионы кислорода, гидроксильный радикал, перекиси неорганического и органического происхождения. Все они являются свободными радикалами: у них «на краю» молекулы есть неспаренный электрон. Обычно электроны располагаются по парам. А этот один. И он из-за этого находится в беспокойном состоянии. Один из способов успокоиться – оторвать электрон у другой молекулы и составить с ним пару.

В живом организме АФК откусывают электроны у белков, ДНК, РНК, липидов – тех молекул, из которых состоит организм. После этого АФК перестает кусаться, зато в свободный радикал с неспаренным электроном превращается молекула, у которой АФК забрал электрон. И все начинается заново. Начинается цепная реакция.

Окислительный (оксидативный) стресс

При увеличении концентрации АФК процесс окисления выходит из-под контроля. Образуются новые радикалы, повреждаются клетки, нарушается обмен веществ и энергии. Это лавинообразный процесс и есть окислительный (оксидативный) стресс. Самое опасное в нем – окисление липидов в клеточной оболочке. Из-за него может погибнуть вся клетка.

Естественная гибель клеток при старении – это одно, но разрушение мембран и гибель здоровых функционирующих клеток – совсем другое. Окислительный стресс влияет на все органы и системы нашего организма. Вот неполный список болезней, которые связаны с действием АФК: инсульт, болезни Альцгеймера и Паркинсона, ишемия, инфаркт, астма, артрит, атеросклероз, язвенная болезнь, катаракта, дерматит.

8-OH-дезоксигуанозин (8-OHdG).

Как видите, количество АФК в организме – важный признак, по нему можно оценить риск окислительного стресса. Вопрос в том, как измерить количество АФК. Для этого есть несколько индикаторов. Один из них – молекулы 8-OHdG. Откуда они берутся?

ДНК реагирует на окислительный стресс острее, чем другие биологические молекулы. ДНК состоит из кирпичиков – нуклеотидов. Из одного из таких кирпичиков (гуанина) под действием АФК и образуется 8-OHdG. Он теряет связь с другими нуклеотидами, и целостность ДНК нарушается. К слову, это один из механизмов образования раковых опухолей.

8-OHdG легко проникает из клеток в кровь, а затем и в мочу. Поэтому он считается одним из лучших клинико-лабораторных индикаторов окислительного стресса и канцерогенеза.

Ликбез завершен, переходим к главному – результатам исследования тайваньских ученых.

СО2 и окислительный стресс

Сам по себе окислительный стресс хорошо изучен. Известно множество факторов образования свободных радикалов с неспаренными электронами: табачный дым, выбросы транспорта и промышленных предприятий, различные лекарства, анестетики, пестициды, чрезмерная физическая нагрузка, частые стрессы и переутомление. Однако раньше никому не пришло в голову связать с окислительным стрессом уровень СО2 в воздухе.

Авторы исследования измеряли концентрацию СО2 и летучих органических соединений в офисных помещениях. В то же время измерялся уровень 8-OHdG в анализах сотрудников. Затем ученые совместили эти данные и проследили статистические закономерности.

Оказалось, что при естественной концентрации СО2 на улице (400 ppm) средний уровень 8-OHdG равен 3.10 условных единиц. Это нормальный показатель: при таких значениях организм не страдает от окислительного стресса. Однако уже при уровне СО2 600-700 ppm концентрация 8-OHdG увеличилась в два раза! Причем, судя по статистическому анализу, влияние СО2 усиливается, когда в воздухе превышен уровень летучих органических соединений.

Вывод

Напомним, что 600-700 ppm углекислого газа – это совсем немного. По нормативам разных стран в помещениях допускается уровень СО2 и 800, и даже 1000 ppm. При этом зачастую мы дышим воздухом, где углекислого газа намного больше – 2000-3000 ppm. Получается, при таком уровне свободные радикалы атакуют наши клетки в несколько раз активнее, чем должно быть в норме. Значит, почти каждый человек регулярно подвергается окислительному стрессу в душном офисе, в спальне с закрытыми окнами, плотно набитом вагоне метро и так далее.

Конечно, одно исследование – не повод бить тревогу. Но это повод задуматься о том, что влияние воздуха на организм намного шире и глубже, чем может показаться на первый взгляд. И система умного микроклимата – необходимая система для современного дома, а вовсе не высокотехнологичная игрушка.

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector