Определение содержания глюкозы
Анализы > Определение содержания глюкозы в крови (анализ крови на сахар)
Для чего необходимо определение содержания глюкозы в крови?
Определение содержания глюкозы в крови (анализ крови на сахар) – важное диагностическое исследование для своевременной диагностики и оценки динамики течения и эффективности лечения различных вариантов сахарного диабета.
Глюкоза в организме человека является незаменимым источником энергии для всех типов клеток. Нарушение ее обмена приводит к необратимым изменениям в общем метаболизме и быстрому повреждению многих тканей и органов (головного мозга, почек, печени, сосудистых стенок и др.). Своевременное выявление отклонений от нормальных значений этого показателя позволяет предотвратить развитие осложнений и значительно улучшить качество жизни пациента.
Показания для назначения анализа крови на сахар
Скрининговое определение содержания глюкозы в крови проводится всем пациентам, которые обращаются за врачебной помощью с любыми жалобами и вне зависимости от диагностированных у них заболеваний. Особе внимание этому анализу уделяют в случае наличия у пациента жалоб на постоянную неутолимую жажду, немотивированное изменение веса, сухость кожных покровов и постоянные воспалительные изменения на них, частые и тяжело протекающие простудные заболевания.
Определение глюкозы в крови раз в 12 месяцев (или чаще) назначают лицам, стоящим на диспансерном учете у терапевта, проходящим профилактические осмотры и имеющим высокий риск развития сахарного диабета (например, если в семье зарегистрированы случаи данного заболевания или у пациента имеется избыточный вес).
Кто назначает такое исследование и где можно его пройти?
Назначить пациенту анализ крови на сахар может любой врач, но чаще всего это делают терапевты или эндокринологи. Выполняют анализ в клинических лабораториях поликлиник или стационарных медицинских учреждений, а также в платных частных клиниках.
Откуда берут кровь для обследования?
Чаще всего используют капиллярную кровь, взятую из подушечки безымянного пальца. В редких случаях для анализа берут венозную кровь, но при этом рассчитывают, что среднее содержание глюкозы в ней выше на 10 %, чем в крови из капилляров.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Если пациенту показано исследование содержания глюкозы натощак, то ему необходимо воздержаться от приема любой пищи на протяжении минимум 12 часов до забора крови. При этом за 6 часов нежелательно принимать лекарственные препараты, чистить зубы или полоскать рот лекарственными растворами. За 4 часа следует оказаться и от питья.
В иных случаях специальной подготовки пациента к данному исследованию не требуется.
Нормальные значения содержания глюкозы в крови
При взятии крови натощак уровень содержания глюкозы в ней не должен выходить за рамки 3,5–5,5 ммоль/л. В случае проведения исследования сразу после приема пищи показатели могут повышаться до 8 ммоль/л, но в течение 2 часов после еды они должны возвращаться к нормальным значениям.
Возможные причины отклонения содержания глюкозы в крови от нормальных значений
Гипергликемия или повышение концентрации глюкозы в крови чаще всего бывает следствием имеющегося сахарного диабета I или II типа. Среди недиабетических причин следует отметить тяжелые стрессы, инфаркт миокарда, прием лекарственных средств из группы кортикостероидов или диуретиков.
Гипогликемия или снижение содержания в крови глюкозы ниже 3,5 ммоль/л может быть результатом передозировке инсулина при лечении сахарного диабета. Часто выявляют гипогликемию у людей с инсулиномами (опухолями, продуцирующими инсулин), алкоголизмом, болезнью Аддисона, у недоношенных младенцев.
Информация размещена на сайте только для ознакомления. Обязательно необходима консультация со специалистом.
Если вы нашли ошибку в тексте, некорректный отзыв или неправильную информацию в описании, то просим вас сообщать об этом администратору сайта.
Отзывы размещенные на данном сайте являются личным мнением лиц их написавших. Не занимайтесь самолечением!
Как сдавать анализы на уровень глюкозы и о чем могут сказать результаты исследований?
Уровень сахара в крови имеет большое значение при диагностике различных заболеваний и в первую очередь – сахарного диабета. Оценить данный показатель помогут лабораторные анализы на глюкозу. Поговорим о них подробнее.
Глюкоза в результатах анализа
Большую часть необходимой нам энергии мы получаем за счет углеводов. В желудочно-кишечном тракте последние расщепляются на простые молекулы-моносахариды – глюкозу, фруктозу и галактозу, причем на долю глюкозы приходится до 80% абсорбированных моносахаридов. В ряде случаев наш организм способен превращать в глюкозу также жиры и белки. Таким образом, глюкоза является основным источником энергии. Стоит отметить, что существенные изменение нормального уровня содержания глюкозы считается весьма тревожным симптомом.
Определить уровень сахара в крови можно только с помощью анализа на глюкозу, но есть некоторые признаки, которые говорят о том, что с этим показателем не все в порядке. Обычно врач дает направление на анализ крови на глюкозу, если у пациента наблюдаются такие симптомы, как:
- повышенная утомляемость;
- головные боли;
- снижение веса при повышенном аппетите;
- сухость во рту, постоянная жажда;
- частое и обильное мочеиспускание, особенно ночью;
- появление фурункулов, долгое заживление язв, ранок и царапин;
- снижение иммунитета;
- зуд в паху при отсутствии инфекций;
- снижение остроты зрения, особенно у лиц старше 50 лет.
Существуют также группы риска. Людям, входящим в них, нужно регулярно сдавать анализ на глюкозу. Это относится к лицам, страдающим диабетом, а также тем, в чьей семье были случаи этого заболевания, людям с избыточным весом и артериальной гипертензией.
Высокий уровень глюкозы в крови может быть связан не с заболеванием, а с приемом некоторых препаратов – например, оральных контрацептивов, мочегонных средств, амфетаминов, стероидных противовоспалительных лекарств.
Типы анализов на уровень глюкозы в крови
Для современной медицины определить уровень глюкозы в крови – не проблема. Разработано много точных методов для выявления этого показателя.
Лабораторные методы
Чаще всего используются лабораторные методы определения уровня глюкозы в крови – они наиболее достоверны.
Биохимический анализ крови на уровень глюкозы
Это самый распространенный, базовый метод определения уровня глюкозы в крови. Он используется в медицине уже несколько десятков лет, так как обладает высокой информативностью и достоверностью. Анализ сдается натощак, для обследования берут 5 мл крови из вены. Результаты выдают очень быстро – на следующий день или даже через несколько часов. Стоимость такого анализа – 300–600 рублей.
Чтобы получить более точную картину, врач иногда назначает дополнительные уточняющие тесты.
Анализ крови на толерантность к глюкозе с «нагрузкой» (глюкозотолерантный тест натощак с нагрузкой)
Этот анализ назначается при подозрении на наличие скрытых нарушений углеводного обмена. Он представляет собой исследование изменений уровня глюкозы в крови после приема насыщенного раствора сахара. Анализ состоит из трех этапов – сначала кровь берут натощак, как в случае обычного биохимического анализа, затем дают пациенту выпить сахарный раствор и следом дважды с часовым интервалом делают повторные заборы проб крови. Между исследованиями пациент не должен есть, пить или курить. Стоимость анализа – 700–850 рублей.
Глюкозотолерантный тест на С-пептиды
Определение С-пептида дает количественную оценку функции бета-клеток, продуцирующих инсулин, дифференцирует инсулинозависимый и инсулиннезависимый сахарный диабет. Средняя стоимость проведения этого теста в лабораториях Москвы – 1500–1700 рублей.
Анализ на гликированный гемоглобин
Гликированный гемоглобин – это форма гемоглобина, которая образуется в результате его взаимодействия с глюкозой. Данный показатель отражает уровень глюкозы крови на протяжении периода жизни эритроцитов, то есть до 120 суток. Этот тест обычно используется для оценки степени компенсации сахарного диабета и позволяет провести раннюю диагностику некоторых форм данного заболевания. Стоимость – 600–800 рублей.
Анализ на уровень фруктозамина
Фруктозамин – это вещество, образующееся в результате взаимодействия белков плазмы с глюкозой. Его количество показывает степень компенсации сахарного диабета на фоне лечения. Кровь сдают утром натощак. Этот анализ отражает средний уровень глюкозы в плазме за 2–3 недели до измерения. Цена теста – 400–600 рублей.
Анализ на уровень лактата
Лактат – это известная всем молочная кислота, которая образуется в процессе расщепления глюкозы в тканях. Именно лактат является причиной мышечных болей после интенсивных тренировок. В норме молочная кислота поступает в кровь и утилизируется. Причиной повышения уровня лактата служит тканевая гипоксия, то есть кислородное голодание клеток. Примерно у половины больных сахарным диабетом лактат повышен. Кровь на лактат сдают утром натощак. Проверить уровень молочной кислоты можно за 800–1100 рублей.
Анализ на уровень глюкозы в крови беременных (глюкозотолерантный тест при беременности)
В сущности, это обычный тест на уровень глюкозы c нагрузкой, разница лишь в понятии нормы – как мы уже говорили, при беременности уровень сахара в крови может повышаться, а примерно 14% будущих мам сталкиваются с разновидностью диабета, получившего название «гестационный». Стоимость теста – 700–850 рублей.
Анализ мочи на уровень глюкозы
Для определения уровня сахара берут не только кровь, но и мочу. В норме у здорового человека глюкоза в моче отсутствует. Ее наличие говорит о развитии сахарного диабета или о его плохой компенсации. Стоимость теста – 280–350 рублей.
Экспресс-методы
Существуют также различные методы для определения уровня сахара в домашних условиях – например, специальные приборы – глюкометры, тест-полоски для определения уровня глюкозы в крови и моче. Они предназначены для самостоятельного контроля уровня сахара – больной может контролировать этот показатель и вести специальный дневник, который поможет доктору в выборе терапии или ее коррекции. Но заменить лабораторные анализы такие тесты не могут – их точность все же далека от идеала.
Анализ крови на глюкозу: как подготовиться и как сдавать?
Чтобы тест дал точный результат, к нему необходимо подготовиться. Некоторые медикаменты, изменения в привычной диете и режиме дня могут значительно повлиять на результаты исследования.
Обычно анализ крови на сахар сдают утром, натощак – между последним приемом пищи и забором крови должно пройти не менее 8–12 часов, а для глюкозотолерантного теста – не менее 12 часов. В течение 3-х дней перед проведением анализа нужно придерживаться своей обычной диеты, не ограничивая себя специально в углеводах, пить побольше воды и отказаться от тяжелых физических нагрузок, алкоголя и приема некоторых лекарств, которые могут исказить результаты – салицилатов, оральных контрацептивов, тиазидов, кортикостероидов, фенотиазина, лития, метапирона, витамина С. Разумеется, перед тем как отказаться от медикаментов, нужно проконсультироваться с лечащим врачом. Перед проведением тестов не рекомендуется курить и пить что-либо, кроме обычной воды. Кроме того, сдавать кровь на сахар нужно в спокойном состоянии, поэтому врачи рекомендуют приходить в поликлинику немного раньше, чтобы минут 15 посидеть в коридоре и успокоиться.
Определение уровня сахара экспресс-методом желательно проводить до еды.
Расшифровка анализов на уровень глюкозы
Норма глюкозы у детей до 14 лет составляет 3,33–5,55 ммоль/л, у взрослых норма глюкозы в крови – 3,89–5,83 ммоль/л, с 60 лет уровень глюкозы в норме возрастает до 6,38 ммоль/л. При беременности нормальным считается уровень 3,3–6,6 ммоль/л. Следует отметить, что беременность может спровоцировать развитие сахарного диабета, поэтому женщине, вынашивающей ребенка, необходимо своевременно сдавать анализ на глюкозу.
О чем могут говорить отклонения?
В норме содержание глюкозы несколько повышается после еды, но стабильно высокий уровень сахара может говорить о наличии таких заболеваний, как сахарный диабет, эндокринные нарушения, панкреатит. Низкий же уровень глюкозы характерен для заболеваний поджелудочной железы, гипотиреоза, цирроза, опухолей желудка и отравлений некоторыми токсичными веществами – например, мышьяком.
Если анализ показал, что уровень сахара повышен, следует немедленно обратиться к врачу. Однако паниковать не стоит – изменение уровня глюкозы может возникать при многих состояниях, причем даже у здоровых людей. К примеру, иногда сахар повышается во время стрессового периода или любой ситуации, когда происходит выброс адреналина – согласитесь, таких моментов в жизни современного человека хватает.
Имейте в виду, что интерпретировать результаты анализа на глюкозу и поставить диагноз может только врач, который учтет не только результаты теста, но и другие показатели и симптомы.
Где можно сдать кровь и мочу на анализ уровня глюкозы?
Провести анализ крови на глюкозу можно как в государственных, так и в частных лечебных учреждениях – лабораториях, больницах и клиниках. В муниципальных медцентрах при наличии полиса ОМС такой тест проводят бесплатно, однако записываться нужно заранее. И будьте готовы к тому, что вам придется отстоять длинную очередь. Это настолько неудобно, что многие люди предпочитают заплатить за анализ, но сделать его без суеты и дискомфорта, в удобном месте и в подходящее время.
При выборе частного центра медицинской диагностики рекомендуем обратить внимание на независимую медицинскую лабораторию «ИНВИТРО». Здесь вам предложат высокий уровень сервиса и комфорта. В любом из многочисленных филиалов «ИНВИТРО» можно сделать все виды анализов крови на глюкозу. Сложная система контроля качества предоставляемых услуг исключает возможность ошибки. Лаборатория имеет множество отделений как в Москве, так и в других городах России, причем все они работают по удобному для пациентов графику.
Лицензия на осуществление медицинской деятельности ЛО-77-01-015932 от 18.04.2018.
Глюкоза
Наиболее распространенный углевод в животном организме — глюкоза. Она играет роль связующего звена между энергетическими и пластическими функциями углеводов, поскольку из глюкозы могут образовываться все другие моносахариды, и наоборот — различные моносахариды могут превращаться в глюкозу.
Более 90% всех растворимых низкомолекулярных углеводов крови приходится на глюкозу; кроме того, в небольших количествах могут присутствовать фруктоза, мальтоза, манноза и пентозы, а при патологии и галактоза. Наряду с ними в крови содержатся связанные с белками полисахариды.
Особенно интенсивно глюкозу потребляют и используют для разнообразных нужд ткани центральной нервной системы, эритроциты, мозговое вещество почек. В промежуточном обмене глюкоза используется для образования гликогена, глицерина и жирных кислот, аминокислот, глюкуроновой кислоты и гликопротеинов. Концентрация глюкозы в крови является производной процессов гликолиза и окисления трикарбоновых кислот в ЦТК, гликогенеза и гликогенолиза в печени и мышечной ткани, глюконеогенеза в печени и почках, поступления глюкозы из кишечника.
В клинической практике обычно исследуют содержание глюкозы в крови, к определению концентрации других сахаров и гликогена прибегают значительно реже. В крови человека глюкоза довольно равномерно распределена между плазмой и форменными элементами, установлено, что в венозной крови содержание сахара на 0,25‑1,0 ммоль/л (в среднем на 10%) меньше, чем в артериальной и капиллярной. Известную диагностическую ценность представляет определение молочной и пировиноградной кислот, активности ряда ферментов углеводного обмена, сиаловых и гексуроновых кислот, серомукоидов, гликозилированного гемоглобина и других показателей.
Содержание глюкозы в моче зависит от ее концентрации в крови, хотя выделяется она как при нормальном, так и при повышенном уровне сахара крови. При повышении концентрации глюкозы в крови преодолевается так называемый почечный порог (у здоровых людей лежит в области 8,3‑9,9 ммоль/л) и наступает глюкозурия. При артериосклеротической почке, при диабете порог повышается и может не отмечаться глюкозурия даже при повышении концентрации глюкозы до 11,0‑12,1 ммоль/л.
Методы определения глюкозы в крови подразделяют на три группы: редуктометрические, колориметрические и энзиматические.
1. Редуктометрические методы:
- титрометрический способ Хагедорна‑Йенсена основан на свойстве сахара восстанавливать при кипячении в щелочной среде железистосинеродистую и железосинеродистую соли калия. По степени этого восстановления титрометрически исследуют концентрацию сахара в крови. Важным преимуществом метода является дешевизна и возможность использования в любой лаборатории;
- основанные на восстановлении нитробензолов, например, пикриновой кислоты в пикраминовую;
- метод, основанный на способности глюкозы восстанавливать соли меди. Образующаяся одновалентная медь выступает в качестве промежуточного вещества. Окисляясь кислородом воздуха, она восстанавливает мышьяковомолибденовую или фосфорновольфрамовую кислоту, которые служат окончательным хромогеном.
Однако следует иметь в виду, что методы этой группы дают завышенные результаты (примерно на 20‑25%), так как в крови присутствует ряд соединений, не относящихся к углеводам, но обладающих восстановительными свойствами (мочевая кислота, глутатион, креатинин, аскорбиновая кислота);
2. Колориметрические методы. К ним относятся:
- метод Сомоджи — реакция восстановления меди, находящейся в составе меднотартронового реактива, до закиси меди. Метод трудоемок, многостадиен, неспецифичен и в настоящее время практически не используется;
- метод Фолина‑Ву — реакция восстановления тартрата меди в закись. Метод прост, недостатком является отсутствие строгой пропорциональности между интенсивностью получаемой окраски и концентрацией глюкозы;
- определение концентрации глюкозы по Моррису и Роэ — дегидратация глюкозы под действием серной кислоты и превращение ее в оксиметилфурфурол, который конденсируется с артроном в соединение синего цвета. Требует чистейших реактивов и четкого соблюдения постояной температуры реакции;
- ортотолуидиновый метод Гультмана в модификации Хиваринена-Никкила, состоящий в определении интенсивности окрашивания раствора, возникающего при взаимодействии ароматического амина ортотолуидина с альдегидной группой глюкозы в кислой среде. Этот способ точен и дает возможность более специфичного определения содержания глюкозы.
- анилиновый метод, сохраняет чувствительность ортотолуидинового метода, но еще более специфичен.
3. Ферментативные методы:
- основанный на гексокиназной реакции. Глюкоза под действием гексокиназы фосфорилируется за счет АТФ, образовавшийся Гл‑6‑Ф в присутствии дегидрогеназы восстанавливает НАДФ. Количество последнего определяют по увеличению светопоглощения в ультрафиолетовой области. Метод слишком дорогостоящий для практических лабораторий.
- основанные на окислении глюкозы до глюкуроновой кислоты с помощью фермента глюкозооксидазы и образовании в ходе реакции перекиси водорода, которая (в разных модификациях):
◊ определяется химическим путем; |
◊ при участии пероксидазы окисляет бесцветный ортотолидин, превращая его в окрашенное соединение зелено‑голубого цвета, прямолинейность зависимости окраски от концентрации глюкозы сохраняется в диапазоне от 1,1 до 22 ммоль/л; |
◊ в присутствии фенола при участии пероксидазы окисляет 4‑аминоантипирин в окрашенное соединение розово-малинового цвета; |
◊ в присутствии ионов меди окисляет фенолфталин до фенолфталеина, который в щелочной среде окрашен в красный цвет. |
4. Электрохимические методы, в которых используются электроды, содержащие иммобилизованные ферменты, в частности, глюкозооксидазу. Реакция регистрируется по количеству образованной перекиси водорода или по убыли кислорода, израсходованного на окисление глюкозы.
5. Диагностические полоски, использующие глюкозооксидазно‑пероксидазную реакцию и производные бензидина в качестве хромогена.
В качестве унифицированных принято три метода: титрометрический метод Хаггедорна-Йенсена, ортотолуидиновый метод и глюкозооксидазный метод с окислением о‑толидина.
Определение содержания глюкозы
ортотолуидиновым методом
Принцип
Глюкоза при нагревании с ортотолудином в присутствии серной кислоты дает сине-зеленое окрашивание.
Нормальные величины
Цельная кровь (указанный метод) | 3,9‑5,5 ммоль/л |
Плазма (тот же) | 3,9‑5,5 ммоль/л |
0,06‑0,83 ммоль/л | |
или Завышенные результаты уровня глюкозы в крови наблюдаются после приема пищи, при применении кофеина, препаратов гормонов надпочечников, тироксина, пероральных контрацептивов, витамина РР (в больших дозах), диуретиков, при физических упражнениях, эмоциональном возбуждении и других стрессовых воздействиях. Влияние in vitro оказывают галактоза и другие моносахара сыворотки крови, аскорбиновая кислота, леводопа, метилдофа, парааминосалициловая кислота и другие. Снижение концентрации отмечается после применения анаболических стероидов, антигистаминных препаратов, токсичных доз ацетилсалициловой кислоты, этанола. На результаты анализа влияет наличие гемолиза (выход глутатиона из эритроцитов), высокое содержание аскорбиновой и ацетилсалициловой кислоты в крови. Клинико‑диагностическое значениеКровьПовышение концентрации глюкозы в крови (гипергликемия) отмечается при:
Гипогликемия встречается при:
Выведение глюкозы возрастает при всех случаях гипергликемии свыше 10 ммоль/л (почечного порога). В этом случае глюкозурии могут быть физиологическими и патологическими:
При нормогликемии глюкозурия может выявляться при повреждениях почечных канальцев — пиело- и гломерулонефриты, токсические поражения, почечный диабет (семейная почечная глюкозурия), нефропатии. Снижение глюкозы в моче (вплоть до исчезновения) является признаком бактериурии. Спинномозговая жидкостьУровень глюкозы повышен при сахарном диабете, эпидемическом энцефалите, сифилисе ЦНС, гипергликемиях различной этиологии. Уменьшение концентрации глюкозы определяется при остром пиогенном менингите, туберкулезном и криптококковом менингите, менингоэнцефалите, опухолях мягкой мозговой оболочки, саркоидозе. Определение содержания глюкозыБолее 90% всех растворимых низкомолекулярных углеводов крови приходится на глюкозу, кроме того, в небольших количествах могут присутствовать фруктоза и пентозы, а при патологии и галактоза. Глюкоза распределена почти равномерно между плазмой и эритроцитами, поэтому может определяться в цельной крови, плазме и сыворотке крови. Нормальное содержание в крови составляет 3,3-5,5 мМ/л. В физиологических условиях в крови может повышаться после обильной углеводной пищи, физиологических нагрузок, сильных эмоций. Гипергликемия наблюдается при многих патологических состояниях: сахарном диабете, панкреатите, травмах и сотрясениях головного мозга, энцефалите, муковисциидозе, психическом возбуждении, отравлениях окисью углерода, ртутью. В зависимости от тяжести сахарного диабета уровень глюкозы натощак составляет : при легкой степени – 6,7-7,8 мМ/л. Гипогликемия бывает при передозировке инсулина, заболеваниях поджелудочной железы, злокачественных заболеваниях, некоторых инфекционных и токсических поражениях печени, гипотириозе, наследственных заболеваниях, связанных с дефицитом ферментов. Глюкозурия отмечается при сахарном диабете, гиперплазии коры надпочечников, нарушениях функции почек, сепсисе, травмах и опухолях головного мозга,отравлениях морфином, панкреатите, синдроме Фанкони. Однократная нагрузка глюкозой вызывает у больных сахарным диабетом медленное нарастание гликемической кривой, при этом гипогликемическая фаза обычно не выявляется, понижение кривой очень медленное. В моче также определяется сахар. В соременной диагностике сахарного диабета критерием является повышение содержания глюкозы в крови натощак до 7, 0 мМ/л, проводят пробу на выявление нарушения толерантности к глюкозе. Пробу проводят с сахарной нагрузкой, исследуют содержание глюкозы в крови натощак после приема внутрь 75 г глюкозы, растворенной в 200-300 мл воды. Кровь из пальца для определения содержания глюкозы берут каждые 30 минут в течение 2 часов. Проводится также тест на определение гликозилированного гемоглобина. В крови глюкоза связывается с молекулой гемоглобина (НвАIс) внутри эритроцитов. Число, связанных частиц глюкозы с молекулой гемоглобина напрямую связано с концентрацией глюкозы в крови, так как эритроциты живут 90 дней. По анализу гликозилированного гемоглобина можно установить концентрацию глюкозы за 3 месяца. Повышение уровня с определенного уровня на 5% говорит о хорошо скомпенсированном сахарном диабете, на 10% — частично компенсированный диабет, на 12% и более – некомпенсированный сахарный диабет. Важно также для диагностики сахарного диабета определение концентрации инсулина и С-пептида. В молекуле преинсулина есть С-пептид, состоящий из 31 аминокислоты, соединяющий А и В цепи. При синтезе инсулина он вырезается пептидазами и вместе с инсулином он попадает в кровоток. До отщепления пептида инсулин не активен. Это позволяет поджелудочной железе образовывать запасы инсулина. С-пептид и инсулин выделяется в равных количествах, поэтому по С-пептиду можно оценить секрецию инсулина. Но надо знать, что скорость выведения из кровотока этих веществ разная. С-пептид дольше находится в крови, чем инсулин и он стабильнее инсулина в 5 раз. У здоровых С-пептид находится в пределах 1-4 нг/мл, инсулин от 6 до 27 мЕ/ мл. Повышение уровня С-пептида может свидетельствовать о гипертрофии В-клеток, об инсулин независимом сахарном диабете (ИНСД). Понижение С-пептида отмечается при инсулинзависимом сахарном диабете (ИЗСД). В диагностике сахарного диабета применят определение концентрации альбумина в моче. В суточной моче у здоровых людей может обнаруживаться до 8 мг белка. При сахарном диабете белок повышается до 20-300 мг/л. Дополнительным критерием на риск возникновения сахарного диабета является определение липидного обмена. Уровень триглицеридов в крови изменяется параллельно повышению содержания сахара в крови. Методы определения глюкозы разделяют на три группы: · методы с использованием цветных реакций, в которых участвуют продукты, образующиеся при нагревании углеводов с концентрированными кислотами. Ферментативные методы исследования сочетают в себе высокую точность, они основываются на одной из двух реакций – гексокиназной или глюкоооксидазной. При гексокиназной глюкоза сначала фосфорилируется за счет АТФ благодаря действию гексокиназы; образовавшийся глюкозо-6-фосфатный эфир в присутствии глюкозо- 6- фосфат-дегидрогеназы восстанавливает NADP, количество которого определяется по увеличению светопоглощения в ультрафиолетовой области. Легче выполнимы глюкозооксидазные методы, в которых глюкозоксидаза окисляет глюкозу кислородом воздуха с образованием перекиси водорода, количество которой определяется или химическим путем, или по ее способности в присутствии пероксидазы окислять диамины с образованием окрашенных продуктов. Принцип метода: Глюкозооксидаза окисляет глюкозу с образованием перекиси водорода, которая под действием пероксидазы окисляет ортотолидин с образованием синего хромогена. Реактивы: 1.Натрия хлорид 9 г/л (0,9г NaСI в 100 мл воды). 2. Сульфат цинка, 50 г/л: 5г сульфата цинка растворяют в воде, объем доводят до 100 мл. 3. Натр едкий, 0,3 моль/л: готовят, растворяя 1,2 NaOH в 100 мл воды. 4. Ортотолиидин, 1% раствор: 1г препарата растворяют в 100 мл абсолютного спирта. 5. Ацетатный буферный раствор рН 4,8: смешивают 4 части 0,25 Н уксусной кислоты и 6 частей 0,25 Н ацетата натрия. 7. Пероксидаза хрена. 8. Рабочий реактив в 80 мл ацетатного буфера растворяют 2 мг глюкозооксидазы и 1 мг пероксидазы, прибавляют 1 мл 1%-ного раствора ортотолидина, перемешивают и доводят объем буферным раствором до 100 мл. 9. Калибровочные растворы глюкозы. Сначала готовят основной раствор с концентрацией 50 ммоль/л, для чего 180 мг глюкозы растворяют в 20 мл бензойной кислоты. Из этого раствора готовят рабочие калибровочные растворы, содержащие: 3 ммоль/л; 6 ммоль/л; 9 ммоль/л; 12 ммоль/л; 15 ммоль/л; 18 ммоль/л; 21 ммоль/л, для чего берут 0,6 мл; 1,2 мл; 1,8 мл; 2,4 мл; 3,6 мл; 4,2 мл основного раствора и доводят насыщенным раствором бензойной кислоты до 10 мл. Эти растворы содержат глюкозу в тех же концентрациях, в которых она бывает в крови. Ход определения: В центрифужные пробирки вносят 1,1 мл хлорида натрия, 0,4 мл раствора сульфата цинка и 0,4 мл 0,3 Н раствора NaOH, перемешивают; при этом образуется очень тонкий гель гидрата окиси цинка, в него выпускают 0,1 мл крови или калибровочного раствора, снава перемешивают и через 10 мин. центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 мин. К 1 мл надосадочной жидкости добавляют 3 мл рабочего реактива и осторожно перемешивают. Через 15 минут развивается окраска и фотометрируют в кюветах с длиной оптического пути 1 см с красным светофильтром (625 нм) против холостого опыта, который ставят одновременно с рабочими пробами, но вместо крови берут физиологический раствор хлорида натрия. При приготовлении калибровочного графика вместо проб крови берут 0,1 мл соответствующего калибровочного раствора. Нормальные величины натощак: 3,5- 5,7 ммоль/л (60-100 мг в 100 мл). Adblock detector |